多位点酶切联合SSCP方法检测结核杆菌inhA基因突变

摘要：

目的建立一种简便而有效的方法检测结核分枝杆菌异烟肼耐药基因inhA突变.方法收集结核杆菌临床菌株48株,其中异烟肼敏感株25株,耐药株23株.抽提临床菌株DNA和H37Rv标准株DNA,聚合酶链反应(PCR)方法扩增inhA基因,产物纯化后用限制性内切酶HaeⅡ酶切,酶切片段用单链多态构象分析(SS-CP)方法检测其单链构象.发现单链构象改变的PCR产物进行DNA测序.结果48株菌株中,25株敏感株中未见inhA基因单链构象差异,23株耐药株中inhA基因突变率为21.8%.新发现的错义突变有:A26E、R27K、V28A、Q32A、L54V和S72T.结论应用限制性内切酶HaeⅡ改良的聚合酶链反应一单链多态构象分析(PCR-SSCP)技术适用于结核临床菌株inhA基因突变的筛选.inhA基因突变位点呈多样性.

关键词：结核分枝杆菌、inhA基因、单链多态构象分析、多位点酶切

所属期刊栏目：31

分类号：R378.91+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家科技攻关项目2001BA705B03

在线出版日期：2004-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：39-41