PKB的PH结构域在原核表达及其纯化和活性

摘要：

目的利用原核系统表达原癌基因丝苏氨酸蛋白激酶B(PKB)的PH结构域,为进一步研究其结构和功能奠定基础.方法我们构建了PKB的PH结构域的表达质粒,在大肠杆菌中表达出PH结构域,并利用蛋白N端加入的组氨酸标签进行亲和层析及离子交换层析纯化蛋白.结果在大肠杆菌中表达的PH结构域以包涵体形式存在,经变性和复性后成为具有天然构象的可溶性蛋白,经亲和层析和离子交换层析纯化的PH结构域具有与磷脂酰肌醇PI*.4,5*.P2的结合能力,证明其具有生物学活性.结论本方法成功表达纯化了PKB的PH结构域,可用作PH结构域结构和功能的进一步研究.

关键词：丝苏氨酸蛋白激酶B、PH结构域、原核表达、蛋白纯化

所属期刊栏目：29

分类号：Q55(酶)

资助基金：上海市教委资助项目B990806;上海市自然科学基金02ZB14019

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：423-427