逆病毒载体介导的双耐药基因在小鼠骨髓细胞的转移

摘要：

目的增强造血细胞对化疗药物的耐受性,探讨逆转录病毒介导的基因转移效率及耐药基因导入在造血细胞保护性基因治疗中的作用.方法应用电穿孔基因转移法将逆转录病毒载体G1Na-MGMT-IRES-MDR1导入病毒包装细胞GP+E86及PA317,以VCR加压筛选后的阳性克隆上清感染小鼠骨髓细胞,应用PCR、Southern bbt及流式细胞仪检测耐药基因MGMT及MDR1在细胞中的转移与表达.结果加压筛选及乒乓效应使病毒滴度由(0.2～7.6)×104 CFU/mL提高到(1.9～5 7)×106CFU/mL,从DNA、RNA及蛋白水平上分别证实了双耐药基因在小鼠骨髓细胞中获得了有效转移和表达,而转基因后的小鼠骨髓细胞对VCR、高三尖杉酯碱和BCNU的耐药性比未转导细胞分别提高了5.7、5.0和8.5倍.结论双耐药基因成功导入小鼠骨髓细胞为肿瘤基因治疗的临床研究提供了实验基础.

关键词：逆转录病毒载体、耐药基因、六氧甲基鸟嘌呤-DN≈甲基转移酶、多药耐药基因、基因转移、骨髓细胞

所属期刊栏目：29

分类号：R962(药理学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

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