Wistar大鼠过敏性脑脊髓炎动物模型的建立

摘要：

1933年Rivers等采用多次肌肉注射兔脑提取物的方法，首次成功建立了和人类多发性硬化(multiple sclerosis,MS)临床特征和病理改变相似的动物模型，即实验性过敏性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)动物模型。随后Morgan 和Kabat又把福氏佐剂(Freund adjuvant,FA)引入到EAE的建立过程中，即把抗原与福氏佐剂混合制成乳剂，单次免疫即可成功诱发EAE［1］，这不但简化了EAE的建立过程，而且极大地提高了模型的可靠性。目前EAE是最常用的中枢脱髓鞘动物模型。由于不同品系动物对EAE的敏感性差异很大，因此制作EAE模型时往往需要特殊品系动物，这给研究工作带来了诸多不便。为此特将一种简便易行的方法，即采用价廉易得的卡介苗(bacille calmette guerin,BCG)和Wistar大鼠诱发EAE的方法介绍如下。
材料和方法
动物 Wistar大鼠，雌性，150～250 g；豚鼠，雌雄不拘，350～450 g；均为上海医科大学实验动物部提供。BCG和百日咳疫苗(bordetella pertussis vaccine, BPV)购自卫生部上海生物制品研究所，BPV的浓度为每毫升含有1010个菌。
完全福氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)的配制将液体石蜡和羊毛脂按2∶1的比例(V/V)共热至70-℃熔融后混匀，分装后高压灭菌，4-℃保存备用。临用前按每毫升加入卡介苗8 mg混匀制成CFA，注意BCG的均匀分散是实验成功的关键。
豚鼠全脊髓匀浆(GPSCH)的制备豚鼠麻醉后，以预冷的0.9%氯化钠溶液心脏灌流至无血液流出后，小心取出豚鼠脊髓，加等量的0.9%氯化钠溶液，制成50%(m/V)的全脊髓匀浆。
EAE的诱导取等量的全脊髓匀浆和完全福氏佐剂，混匀后制成稳定的油包水型抗原乳剂，放置24 h以上应不分层。分别采用GPSCH和GPSCH+BPV这两种方法诱导EAE。其中前者为大鼠每只脚垫皮内注射0.1 ml抗原乳剂，每只动物计0.4 ml；后者为每只脚垫皮内注射等量抗原乳剂的同时，每只动物后肢皮下加注BPV 0.25 ml。对照组动物则脚垫皮内注射CFA和0.9%氯化钠溶液制成的乳剂，注射部位和剂量同GPSCH组。

关键词：过敏性脑脊髓炎、卡介苗、百日咳疫苗、动物模型

所属期刊栏目：27

分类号：R744.3(神经病学与精神病学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：471-472