利用新型表达载体pc DNA 3.1/Myc His表达sIL 4受体

摘要：

@@ 近二十年来，分子生物学技术飞速发展，并在各个领域得到了广泛的运用。通过构建目的基因表达质粒转化细菌或转染细胞，合成重组蛋白质技术日臻成熟［1］。在抗体制备方面，传统的方法是通过分离、纯化抗原，免疫动物制备相应抗体。而要得到一定量纯度较高的抗原往往困难较大且过程烦琐，特别是一些表达量较低的抗原，尤为困难。随着分子生物学技术的发展，利用基因工程合成蛋白质成为可能，为制备高质量抗原开辟了新的领域。现介绍利用一种新的在哺乳动物细胞中高效表达的载体pc DNA 3.1/Myc?His，合成重组大鼠可溶性IL?4受体(sIL?4R)蛋白。
材料和方法
RT?PCR扩增sIL?4R基因片段雄性5周龄Wistar大鼠1只，取脾脏，液氮内速冻，利用Isogen RNA抽提试剂(日本基因公司，日本)，参照说明书推荐方法，一步法提取总RNA。电泳鉴定RNA完整未降解，测OD 260/280值定量。取2 μg总DNA，以MULV逆转录酶(Toyobo公司，日本)常规方法逆转录反应合成cDNA［2］。

关键词：基因工程、重组蛋白质、pcDNA 3.1/Myc-His质粒、瞬时表达

所属期刊栏目：27

分类号：R392.11

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：298-299,301