三种犬呼吸道常见病毒多重PCR检测方法建立
为建立犬呼吸道冠状病毒(Canine respiratory coronavirus,CRCoV)、犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)、犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)3种病毒的多重PCR方法,根据GenBank中CRCoV、CPV和CDV的基因序列,进行BLAST同源性分析,找出保守序列,并根据保守序列对每个病毒设计引物,建立扩增3种病毒的多重PCR方法,并通过已建立的方法对收集的呼吸道病犬病料进行检测.结果 表明,所建立的三重PCR体系组成为2×Taq Mix 12.5 μL,3对上、下游引物各0.6 μL,混合模板1 μL,ddH2O 7.9 μL;扩增程序为94℃ 5 min;94℃ 30 s,54℃ 1 min,72℃ 24 s,共35个循环;72℃ 8 min.该方法具有较高的灵敏性和特异性.临床验证实验表明,本实验所建立的多重PCR方法可用于临床诊断.
犬呼吸道冠状病毒、犬细小病毒、犬瘟热病毒、多重PCR方法
浦东新区科技发展基金民生科技项目“犬传染性呼吸系统疾病重要病原感染流行及其诊治技术研究”PKJ2018-N04
2021-02-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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