荧光定量PCR检测鸡马立克氏病血清1型病毒方法的建立及应用

摘要：

为了建立一种快速的鸡马立克氏病血清1型病毒（MDV‐1）病原检测方法，试验采用针对MDV‐1基因序列保守区域设计1对特异性引物和1条特异性的探针，通过构建重组阳性标准质粒的方法，构建重组质粒作为阳性标准品，建立了检测MDV‐1核酸的荧光定量PCR方法。优化反应体系和条件后进行特异性、敏感性、重复性试验。结果显示，该检测方法特异性强，与其它禽源病毒如新城疫病毒（NDV）、禽流感病毒（AIV）、传染性支气管炎病毒（IBV）、传染性法氏囊病病毒（IBDV）、鸡传染性贫血病毒（CIAV）和J亚群禽白血病病毒（ALV‐J）均不发生交叉反应；该方法可检测到4．6×101拷贝／mL的病毒核酸，与常规PC R相比，敏感性高100倍；重复性试验的变异系数小于2％。研究结果表明所建立的Real‐time PCR检测方法特异性强、灵敏度高、可重复性好，可用于M DV‐1的定量检测。

关键词：马立克氏病血清1型病毒、Meq基因、病毒检测、荧光定量PCR

分类号：S85;TQ4

资助基金：广西区水产畜牧兽医局科技项目桂渔牧科1204935

在线出版日期：2015-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：19-21