草氨酸钠对胆管癌细胞自噬与凋亡的影响

摘要：

目的 观察乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)抑制剂草氨酸钠对人胆管癌细胞株Hucct-1自噬与凋亡的影响,并初步探讨其相关机制.方法 用不同浓度的草氨酸钠处理Hucct-1细胞,或将LDHA小干扰RNA转染Hucct-1细胞后,CCK8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕愈合实验检测细胞迁移,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测自噬相关mRNA和蛋白的表达水平,乳酸检测试剂盒检测细胞内乳酸的含量.结果 草氨酸钠抑制Hucct-1细胞增殖(P＜0.01),并呈剂量依赖性,其半数抑制浓度为50 mmol/L.用50 mmol/L草氨酸钠干预Hucct-1细胞或LDHA小干扰RNA转染Hucct-1细胞后,LDHA mRNA和蛋白表达水平均降低(均P＜ 0.01),细胞内乳酸的含量减少(P＜0.01),细胞凋亡率升高(P＜0.01),细胞迁移距离缩短(P＜0.01),细胞中自噬相关基因7(autophagy-related gene7, ATG7)、Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3 Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3 Ⅱ,LC-3 Ⅱ)表达水平升高(均P＜0.01),P62蛋白表达水平降低(P＜0.01).结论 草氨酸钠通过抑制Hucct-1细胞中LDHA表达来促进细胞自噬,诱导细胞凋亡.

关键词：草氨酸钠、胆管癌、乳酸脱氢酶A、细胞自噬、细胞凋亡

所属期刊栏目：40

分类号：Q95-33(动物学)

资助基金：昆山市科技计划项目KS1537

在线出版日期：2020-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：403-409