鼠痘病毒环介导等温扩增可视化检测方法的建立

摘要：

目的 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立一种鼠痘病毒(ECTV)的可视化快速检测方法.方法 通过序列分析选择3段ECTV序列保守区域设计了9套LAMP引物,利用LAMP Real Time Turbidimeter LA-320C仪监测反应进程并筛选最佳引物组合,优化反应条件,建立了对ECTV核酸进行特异性扩增的LAMP检测方法,并可通过加入目测荧光检测试剂肉眼判断结果.对所建立的方法进行了敏感性、特异性评估,并对人工感染样品进行了检测.结果 该方法在63℃恒温下作用60 min,ECTV DNA获得了高效特异性扩增,与其余常见小鼠病毒无交叉反应;最低检出量为530 fg/μL,是常规PCR的103倍,加入目测荧光染料判断结果与Real Time Turbidimeter LA-320仪监测结果一致.结论 建立的ECTV LAMP检测方法具有快速、特异、灵敏和操作简单的特点,或具有良好应用前景.

关键词：鼠痘病毒(ECTV)、环介导等温扩增技术(LAMP)、实时、快速检测

所属期刊栏目：38

分类号：Q95-33(动物学)

资助基金：上海市科委科技创新行动计划15140900600;上海市科委研发平台专项15DZ2292400

在线出版日期：2018-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：343-349