兔免疫球蛋白液相芯片的制备及其检测方法的建立

摘要：

目的 制备实验兔的免疫球蛋白液相芯片,建立液相芯片技术(xMAP)检测方法.方法 分别将兔IgG、IgM和IgA亲和纯化的捕获抗体耦联至荧光编码微球,对蛋白耦联量进行优化,制备兔IgG、IgM和IgA液相芯片,同步检测白毛黑眼兔(WHBE兔)和日本大耳白兔(JW兔)血清中IgG、IgM和IgA相对含量,建立可应用于实验兔免疫球蛋白半定量检测的xMAP方法,并对其结果用ELISA方法进行验证.结果 (1)IgG、IgM和IgA的最佳蛋白耦联量分别为10、20和15μg.(2)xMAP检测结果显示,WHBE兔血清中IgG、IgM蛋白含量显著低于JW兔(P＜0.05),IgA蛋白含量显著高于JW兔(P＜0.01); ELISA检测结果表明,WHBE兔血清中IgG、IgM蛋白含量显著低于JW兔(P＜0.05,P＜0.01),其中IgM蛋白含量变化达到极显著水平,IgA蛋白含量显著高于JW兔(P＜0.01).结论 应用制备的兔IgG,IgM和IgA液相芯片建立的xMAP方法,对实验兔血清进行检测,检测结果与ELISA结果一致,提示该方法可应用于实验兔血清的IgG、IgM和IgA半定量检测.

关键词：免疫球蛋白、液相芯片、xMAP、实验兔

所属期刊栏目：33

分类号：Q95-33(动物学)

资助基金：1.浙江省教育厅重大科技攻关项目ZD2009004;2.浙江省科技计划项目2011C37093;3.“浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目”资助

在线出版日期：2014-02-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：433-438