pSecTag-EGFP真核表达载体的构建及其转染鸡胚胎成纤维细胞的研究

摘要：

目的 研究pSecTag真核表达载体转染鸡胚胎成纤维细胞的转染效率,选出该质粒转染鸡胚胎成纤维细胞的最佳转染条件,从而为研究目的 基因在鸡胚胎成纤维细胞中成功表达奠定基础.方法 用PCR方法克隆得到EGFP基因,通过酶切、连接、转化的方法构建了pSecTag-EGFP分泌型真核表达载体,设计优化试验,通过脂质体介导的方法转染鸡胚胎成纤维细胞,用Bradflord检测法检测正交优化不同组合细胞培养液中所表达分泌的增强绿色荧光蛋白的相对含量.结果 成功构建psecTag-EGFP分泌型真核表达载体,并选出该质粒转染鸡胚胎成纤维细胞的最佳转染条件,即脂质体加2μl、质粒加1.0μg.结论 脂质体介导的方法能有效转染鸡胚胎成纤维细胞.

关键词：鸡胚胎成纤维细胞、EGFP基因、真核表达载体

所属期刊栏目：28

分类号：Q95-33(动物学)

在线出版日期：2008-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：318-320