大鼠肝卵圆细胞增殖模型建立及其纯化鉴定

摘要：

为建立大鼠卵圆细胞增殖模型,分离纯化卵圆细胞并对其特性进行研究,SD大鼠喂饲2-乙酰氨基芴(2-acetyailamifluorene,2-AAF),剂量分别为5、10、15、20 mg/kg,连续给药6 d,于第7天行三分之二部分肝切除,术后继续给药1周,每隔3 d取肝组织行常规组织学观察,作细胞增殖试验及免疫组化染色.通过免疫磁珠标记C-kit阳性细胞以纯化卵圆细胞(Magnetic activated cell sorting,MACS),用免疫细胞化学及RT-PCR对纯化细胞进行鉴定.结果:10、15、20 mg/kg三种剂量2-AAF均可成功建立卵圆细胞增殖模型,卵圆细胞增殖于第8天较明显,至第11天达高峰,第14天有所减少.卵圆细胞胞核Brdu染色阳性,其除表达卵圆细胞特异性抗原OV6外,尚表达肝细胞标记白蛋白及胆管细胞标记CK19.胚胎期肝细胞抗原AFP、连接蛋白43在卵圆细胞中亦有高表达,同时还表达造血干细胞标记C-kit.以MACS纯化的C-kit阳性卵圆细胞,90%以上为OV6阳性,并有AFP、白蛋白、CK19 mRNA转录.结论:2-AAF剂量为10～20 mg/kg时可获得满意的大鼠卵圆细胞增殖模型,增生的卵圆细胞为具有双向分化潜能的肝干细胞/前体细胞,利用C-kit标记通过MACS可纯化这种肝干细胞/前体细胞.

关键词：卵圆细胞、肝前体细胞、干细胞、免疫组化

所属期刊栏目：24

分类号：Q95-33(动物学)

在线出版日期：2004-04-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：7-10,15