血清替代培养法使血清外泌体干扰最小化

摘要：

外泌体是细胞之间及细胞和细胞外基质之间信号交流的途径之一.近年来,对外泌体的研究呈现显著增长的态势.在体外细胞培养系统中,为保证细胞正常的生理状态,血清是培养液中必须添加的成分.随之而来的问题是,由于血清中含有大量外泌体,其数量数倍于研究中需要进行针对性研究的特定外泌体,从而对特定外泌体的定量和分析造成了干扰.为了去除培养液血清中的外泌体,很多研究者采用差速离心法、密度梯度离心法等进行处理.该研究通过流式细胞分析对外泌体定量后发现,加入2％血清的培养液在进行差速离心处理后,外泌体数量减少了 30.6％;而加入 5％的血清培养液,外泌体数量下降了32.4％.由此可见,差速离心处理对不同浓度血清的培养液结果类似,只能去除约 30％的血清外泌体,留下约70％的血清外泌体,仍然会对实验数据造成干扰.因此,在人脐静脉内皮细胞体外培养系统中,该研究探索了一种新型血清替代培养法,即以无生物成分的血清替代物XerumFree替代培养液中的大部分血清,经过对一系列配比进行探索发现,当XerumFree与胎牛血清FBS体积比为 15:1时,细胞既可以正常生长,又可以分泌外泌体,而背景中外泌体干扰程度降低到2％,从而较好地解决了外源性外泌体形成的背景干扰问题,为体外研究外泌体提供了明确的参考方案.

关键词：外泌体、细胞培养、差速离心、血清

所属期刊栏目：44

分类号：Q-31(生物科学的研究方法与技术)

资助基金：上海市科委科技创新行动计划实验动物研究领域项目16140901900

在线出版日期：2023-04-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：42-49