瘤背石磺磷脂酶C基因的克隆及在不同声波刺激下的表达
磷脂酶C(Phospholipase C,PLC)是一类与膜蛋白相关的酶,在信号转导途径中起作用.栖息于潮间带的瘤背石磺(Onchidium reevesii)能够感知当地的潮汐规律,为了探究瘤背石磺中磷脂酶C在潮汐感知中的作用和分子机制,本实验以瘤背石磺神经环为实验材料,利用RACE-PCR技术得到了其cDNA全长,并进行生物信息学分析和实时荧光定量PCR实验.结果显示,瘤背石磺PLC基因的cDNA全长为2 578 bp,开放阅读框1 881 bp,5'非编码区337 bp,3'非编码区340 bp,并且在末端存在AATAAA加尾信号,共编码627个氨基酸;氨基酸序列比对结果显示,瘤背石磺PLC氨基酸序列与福寿螺的磷脂酶C样蛋白2氨基酸序列匹配度最高,与传统形态学的分类相吻合.在实验室内模拟潮汐产生的音波来刺激瘤背石磺,使用实时荧光定量PCR检测OrPLC基因在瘤背石磺神经环中的表达,结果显示:OrPLC在刺激声波频率为40 Hz和70 Hz的时候表达量基本稳定;声波频率为160 Hz和310 Hz时表达量较低;在声波频率为220 Hz和280 Hz时,处于高表达的状态,说明该基因在瘤背石磺的低频感知中发挥重要作用.该实验为进一步了解瘤背石磺潮汐感知功能研究奠定了理论支撑.
瘤背石磺、磷脂酶C、低频声波、潮汐节律、基因表达
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S917(水产基础科学)
国家自然科学基金41276157
2022-04-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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