南极独角雪冰鱼HSP90β基因cDNA序列克隆及其原核表达

摘要：

为研究南极鱼类HSP90β蛋白与低温适应的相关性,本研究克隆获得了南极独角雪冰鱼(Chionodraco hamatus,CH)热休克蛋白HSP90β基因的完整开放阅读框,并以尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus,ON)HSP90β蛋白为对照,进行低温胁迫下的原核表达研究.结果表明:克隆获得的独角雪冰鱼HSP90β基因编码区全长为2 184 bp,推定编码728个氨基酸.多重序列比对显示,独角雪冰鱼HSP9oβ与其他鱼类HSP90β的氨基酸序列同源性在87％以上;蛋白结构域分析发现,独角雪冰鱼HSP90β具有HSP90家族的保守信号区,其重要功能位点的氨基酸残基非常保守.构建pET28-CH-HSP90β和pET28-ON-HSP90β重组表达载体,观察4℃低温胁迫8h和12h后,HSP90β蛋白对大肠杆菌生存能力的影响.结果显示:C.hamatus-HSP90β组的大肠杆菌存活率显著高于O.niloticus-HSP90β组和空载体pET28a对照组,这表明南极冰鱼HSP90β在低温条件下具有更加显著的细胞保护功能.由此推测HSP90β蛋白参与了南极冰鱼低温适应的生理过程.

关键词：热激蛋白90β、南极冰鱼、保守信号区、低温适应、细胞存活率

所属期刊栏目：24

分类号：Q71(生物大分子的结构和功能)

资助基金：国家自然科学基金;上海市教委科研创新项目曙光计划;教育部科学技术研究项目

在线出版日期：2015-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：668-677