总状毛霉甲壳素脱乙酰酶(CDA2)全长cDNA的克隆及原核表达

摘要：

采用快速扩增cDNA末端(RACE)克隆技术,通过设计甲壳素脱乙酰酶简并引物,从总状毛霉(Mucor racemosus)菌丝体中克隆了CDA2的基因(EF468349)及其全长cDNA(DQ678929)序列.与已获得的总状毛霉菌cda1基因相比,cda2基因中不含内含子.总状毛霉cda2全长cDNA为1 378 bp,包含23 bp 5'端非翻译区、1 254 bp开放阅读框和101 bp 3'端非翻译区,编码一条由418个氨基酸残基组成的多肽链,其N端包含一段21个氨基酸残基组成的信号肽,在150～272氨基酸残基区存在一个多糖脱乙酰酶保守结构域.通过构建pET28a-cda2表达载体和进行原核表达研究,结果显示:原核表达产生的重组蛋白CDA2的分子量约为46ku,表达形式以包涵体为主,纯化获得的重组蛋白CDA2具有甲壳素脱乙酰酶催化活性.本研究为进一步研究总状毛霉CDA2的结构和功能奠定了基础.

关键词：甲壳素脱乙酰酶、甲壳素脱乙酰酶2基因、cDNA克隆、总状毛霉、原核表达

所属期刊栏目：20

分类号：Q939.9(微生物学)

资助基金：上海海洋大学博士启动基金;优秀青年教师基金

在线出版日期：2011-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：44-49