鲈鱼白细胞介素-8 cDNA序列的克隆与原核表达
采用RT-PCR方法扩增和克隆了鲈鱼自细胞介素-8(LjIL-8)的编码阅读框.该编码阅读框由300个核苷酸组成,编码由99个氨基酸组成前体蛋白.LjIL-8氨基酸序列与哺乳动物和鱼类IL-8类似物的氨基酸同源性分别为23%~48%和25%~92%.氨基酸序列分析表明,N端存在一长23个氨基酸的信号肽,含有形成2个链内二硫键的4个半胱氨酸.分子进化分析表明,LjIL-8与欧洲鲈鱼的亲缘关系最近.将LBL-8编码序列克隆到原核表达载体pET-28a(+),转化E.coli BL21(DE3)后用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE检测结果表明,预期分子量大小的小分子蛋白在大肠杆菌中成功表达,Western-blotting检测结果显示,目的蛋白能与抗6×His单克隆抗体发生特异性反应.
鲈鱼、白细胞介素-8、克隆、原核表达
19
Q785;Q786;S917(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金;浙江省科技厅支撑与引导项目;宁波市海洋与渔业局项目
2010-10-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
447-451