新加坡石斑鱼虹彩病毒ORF086蛋白的原核表达、纯化及抗体制备
新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)是导致石斑鱼养殖严重经济损失的主要病原体.本研究构建了含有新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)ORF086基因的重组表达质粒载体pET32a-ORF086,将其转化到大肠杆菌中进行融合表达, 经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,证实重组大肠杆菌融合表达了SGIV ORF086蛋白.经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isoprophl-thio-β-D-galactopyranoside, IPTG)浓度、诱导温度、诱导时间等诱导表达条件的优化,确定在0.7 mmol/L IPTG、16 ℃诱导14 h时可溶性SGIV ORF086重组蛋白占重组蛋白的60%.经镍琼脂糖凝胶柱纯化重组蛋白,纯化度达95%以上.用纯化的SGIV ORF086蛋白免疫小鼠,获得了高效特异的SGIV ORF086抗血清.
新加坡石斑鱼虹彩病毒、原核表达、多克隆抗体、SGIV、ORF086重组蛋白
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Q786;S917(基因工程（遗传工程）)
广东省自然科学基金06104920
2010-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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