10.3969/j.issn.1004-7271.2007.05.016
草鱼肝细胞系中CYP3A活性检测方法
红霉素-N-脱甲基酶(ERND)是细胞色素P450 3A(CYP3A)依赖的酶类,可通过测定该酶催化代谢产物甲醛的量来反映其活性,从而评价CYP3A活性的高低.以草鱼肝细胞系(GCL)为模型,红霉素为底物,采用Nash比色法检测ERND产物甲醛含量,Lowry比色法测定细胞蛋白含量,建立鱼类细胞中CYP3A活性的简便检测方法.研究表明,底物以0.4 mmol/L作用60 min后进行检测较为合适.细胞样品中ERND产物甲醛平均回收率为78.80%±4.37%,平均日内精密度为2.80%±1.40%,平均日间精密度为3.91%±1.45%,通过计算探针酶ERND活性可为鱼类细胞CYP3A活性的评价提供简便可靠的方法,从而为鱼类药物代谢酶体外诱导模型的研究奠定了基础.
细胞色素P450 3A、红霉素-N-脱甲基酶、鱼类、细胞、甲醛
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S917(水产基础科学)
国家自然科学基金30371109;上海市教委资助项目E03009;上海市重点学科建设项目Y1101
2007-10-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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