3-磷酸甘油醛脱氢酶、β-肌动蛋白和18S rRNA作为相对定量的内标在牙鲆发育阶段的稳定性比较

摘要：

@@ 定量确定基因表达水平的方法主要有实时定量PCR和相对定量检测.一般只有在需要确定基因的拷贝数时,才利用实时定量PCR检测.目前大部分的研究中还是选择相对定量的检测.相对定量检测有Northern blot和相对定量PCR两种检测方法,均需要采用内标来确定目标基因的相对表达量.大多数的内标采用管家基因如3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH) 、β-肌动蛋白基因等[1,2].近年来,越来越多的研究者发现GAPDH,肌动蛋白基因的表达水平并不稳定,利用它们作为内标来定量并不准确[3-5].我们在前期的研究中,利用抑制差减技术也克隆到牙鲆GAPDH和β-肌动蛋白基因,表明这两个基因在牙鲆发育过程有可能表达水平上有差异.为了确定GAPDH和β-肌动蛋白基因表达的稳定性,本研究将这两种基因的表达量分别与另一种常被用作内标的18S rRNA的表达量作比较.

关键词：3-磷酸甘油醛脱氢酶、β-肌动蛋白、18S rRNA、内标、相对定量RT-PCR、牙鲆

所属期刊栏目：14

分类号：S917(水产基础科学)

资助基金：上海市教委资助项目科2000-104;上海水产大学校科研和教改项目科2002-43

在线出版日期：2005-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：84-88