盐胁迫下大麦酵母双杂交文库的构建与鉴定

摘要：

为研究盐胁迫下大麦耐盐相关蛋白的互作蛋白,利用Gateway技术构建盐胁迫下大麦的酵母双杂交文库.首先提取受盐胁迫的大麦总RNA,分离mRNA并合成双链cDNA,并通过位点特异重组系统(BP重组)将双链cDNA转入pDONR22载体,构建初级文库.然后,将初级文库质粒通过同源重组转入pGADT7-DEST载体,构建次级文库.最后,将次级文库质粒转入酵母菌株Y187中构建酵母双杂交文库.经鉴定,该酵母双杂交文库的滴度为7.0×107 CFU/mL,插入cDNA片段平均长度大于1 000 bp,重组率大于95.8％.所构建的酵母双杂交文库质量较高,可用于后续的互作蛋白筛选工作.

关键词：盐胁迫、大麦、酵母双杂交、cDNA文库

所属期刊栏目：35

分类号：S512.3;Q78(禾谷类作物)

资助基金：国家自然科学基金;上海市科技兴农重点攻关项目;上海市科学技术委员会科研计划项目;现代农业产业技术体系建设专项资金

在线出版日期：2020-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1-5