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10.15955/j.issn1000-3924.2016.01.06

猪圆环病毒2型 LAMP 可视化快速检测方法的研究

引用
本研究旨在建立有效的针对猪圆环病毒2型(PCV2)的诊断技术及开发试剂盒。采用环介导等温扩增方法(LAMP)检测猪圆环病毒2型(PCV2),对 PCV2的 ORF2基因设计出3对特异性引物,扩增 PCV2基因的最佳温度和时间优化到59℃孵育55 min。用该方法对临床样品进行检测,LAMP 检测对 PCV2的检测限为10拷贝?μL,而常规 PCR 检测法的检测限为1000拷贝?μL,表明 LAMP 检测法灵敏度高。该检测法不会与猪圆环病毒Ⅰ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎的猪病毒和轮状病毒发生交叉反应。用建立起的 LAMP 检测法对1100个临床样品进行检测,950个样品被检测出为阳性样品。稳定性试验表明该试剂盒可以耐受至少40次的反复冻融。结果显示,该方法建立的猪圆环病毒2型诊断方法灵敏度高,特异性强,稳定性好。

猪圆环病毒 2 型、环介导等温扩增、检测、诊断试剂盒

S852.65(动物医学(兽医学))

上海市闵行区重大产业化专项2014MH076

2016-04-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

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上海农业学报

1000-3924

31-1405/S

2016,(1)

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