猪乙脑病毒重组E基因的克隆表达及间接ELISA检测方法研究

摘要：

参照已发表的猪乙脑病毒（JEV）基因组序列，设计引物，扩增出 E 基因，克隆到 pMD19-T 载体中。序列分析表明：E 基因与 NCBI 登录的 JEV 毒株 E 基因序列同源性达到96.6％—99.7％；遗传进化分析表明：该 JEV属于 GIII 病毒。将 E 基因片段亚克隆到 pET32a-E，IPTG 诱导表达 E 蛋白。Western Blot 检测表明：该重组蛋白能与 JEV 高免血清发生非特异性反应，证明该表达产物为 JEV E 蛋白。以重组 E 蛋白为包被抗原，建立检测猪 JEV抗体的间接 ELISA 方法，检测160份猪血清样品，与猪 JEV 抗体检测试剂盒进行平行性对比，结果显示二者的吻合率为92.2％，表明建立的 ELISA 方法具有较好的特异性，有望为临床提供一种 JEV 血清抗体检测方法。

关键词：乙脑病毒、E基因、重组E蛋白、间接ELISA

分类号：S85;TH1

资助基金：上海市农业遗传育种重点实验室开放基金Shagb2011-01

在线出版日期：2015-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

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