儿茶酚双加氧酶基因大肠杆菌表达体系研究

摘要：

从恶臭假单孢菌(Pseudomonas sp. S-47)的DNA中扩增得到924bp编码儿茶酚双加氧酶的基因片段,将其构建入pBluescript SK载体BamHI和SacI位点间.测序结果显示与Kim(2000)报道一致.将该基因插入带庆大霉素抗性基因启动子和t1t2终止子载体pG251、分别带ompA和EAP信号肽、lpp和Gmr启动子载体pYF395和pYF5254中,构建组成型表达载体pG251,分泌型表达载体pYFX1,pYFX2.酶活测定结果显示pG251为665mu/mL,pYFX1,pYFX2分别为1815mu/mL,1015mu/mL.SDS-PAGE电泳显示表达蛋白产物的分子量约为35kD.分泌型表达载体pYFX1表达量大于pYFX2,组成型表达载体pGX1由于使用弱启动子表达量较低.

关键词：儿茶酚双加氧酶基因、克隆、表达、酶活分析

所属期刊栏目：19

分类号：X512;Q946.82+3;Q554+.9(大气污染及其防治)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1-4