透明颤菌血红蛋白(VHb)基因合成及原核生物中的效应

摘要：

以"连续延伸PCR基因合成法"(姚泉洪 1999),按植物偏爱密码子,合成了全长441bp的透明颤菌血红蛋白(Vitreoscilla hemoglobin VHb)基因.此方法不需用连接酶,而用高保真DNA聚合酶pwo及7个长度为90bp左右的长寡核苷酸引物,经一次PCR反应即完成了全长为441bp基因合成.PCR产物经BamHI和SacI酶切,克隆入pBluescript载体,合成的VHb基因经克隆和测序证实与设计一致.与报道的VHb基因相比,核苷酸改动了98个.G+C含量由原来的45.3%提高到47.8%.将该基因克隆入庆大霉素抗性基因启动子后,构建表达载体pYP2001h(VHbp).将其转入大肠杆菌菌株DH5α,在氧胁迫、缺乏、充足等三种情况下,绘制其生长曲线,探讨了合成VHb基因在原核生物中的效应.结果显示,合成的VHb基因在氧胁迫条件下能加快细菌的生长,增加产量.

关键词：透明颤菌血红蛋白基因、基因合成、连续延伸PCR、序列分析、生长曲线

所属期刊栏目：16

分类号：Q939.121;Q753;Q784(微生物学)

资助基金：上海市科技兴农科技攻关项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：19-24