猪链球菌2型c-di-AMP水解蛋白基因gdpP的表达与活性分析

摘要：

为研究猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)环二腺苷酸(c-di-AMP)水解蛋白GdpP的生化特性,根据已公布的SS2中国强致病株98HAH33全基因组中的gdpP序列信息设计引物,以SS2强致病株HA9801基因组为模板,通过PCR方法克隆获得了SS2的c-di-AMP水解蛋白基因gdpP完整序列,其阅读框由1965个核苷酸组成,编码654个氨基酸.应用大肠杆菌重组表达系统,表达、纯化了GdpP,进而分析了其体外生物活性,结果显示纯化的重组蛋白可以在体外水解c-di-AMP形成pApA.其水解酶活性在碱性环境条件下(pH 8.0)相对较强,而在酸性环境下(pH 6.0,6.5)未检测到活性;同时,水解酶活性还依赖于二价金属离子Mg2+、Mn2+以及Co2+的存在,且在Mn2+存在的条件下相对活性最强,而在Ca2+、Fe2+和Cu2+存在的条件下则均未表现出活性.上述结果为进一步深入研究c-di-AMP在猪链球菌2型中发挥的生物学功能奠定了基础.

关键词：环二腺苷酸、GdpP、水解酶活性、猪链球菌2型

所属期刊栏目：33

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31172381和31372500;上海市科技兴农中重点攻关项目2014-3-1

在线出版日期：2015-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：34-39