人核糖体40S亚基RPS11蛋白的原核表达和纯化

摘要：

RPS11是核糖体小亚基40S的组成部分,属于核糖体蛋白S17p家族,由RPS11基因所编码,主要存在于真核生物中.本研究通过PCR扩增RPS11基因,构建pET43 a-RPS11和pGEX-4T-1-RPS11原核表达载体.将重组质粒转入E.coli DH5α,序列测定正确后,将其转入E.coli BL21 (DE3),加入IPTG诱导表达.表达蛋白经SDS-PAGE分析后,利用亲和层析法纯化蛋白.结果成功克隆RPS11基因,构建了原核表达载体pET43 a-RPS11和pGEX-4 T-1-RPS11,转化宿主菌E.coli BL21 (DE3)中进行了表达.SDS-PAGE分析证实表达目的蛋白正确.通过Ni-TNA和GSH-Sepharose层析柱获得纯化蛋白,为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了基础.

关键词：人核糖体蛋白、RPS11、原核表达、蛋白纯化

所属期刊栏目：32

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金面上项目31070132;2011年度高等学校博士学科点专项科研基金20110073110046

在线出版日期：2014-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：31-35