鹅SCD1基因真核表达载体构建及在肝细胞中的表达

摘要：

构建硬酯酰辅酶A去饱和酶1 (Stearoyl-CoA Desaturase l,SCD1)真核表达质粒pcDNA3.1(+)/SCD1,转染鹅原代肝细胞验证其对细胞中脂肪代谢的影响.根据鹅SCD1基因设计带有酶切位点引物,RT-PCR扩增SCD1基因,克隆至pMD-19T载体,亚克隆至pcDNA3.1载体,构建重组真核表达载体pCDNA3.1(+)/SCD1.酶切及序列测定测序正确后转染鹅原代培养肝细胞,荧光定量PCR检测SCD1基因的表达,并用油红O染色检测细胞中脂滴情况.结果:成功构建SCD1基因真核表达载体,转染鹅原代培养肝细胞后SCD1基因获得了表达,与脂肪代谢相关基因SREBP表达上调,同时检测到细胞中脂滴明显增多.结论:构建了重组质粒pCDNA3.1(+)/SCD1,并在鹅原代培养细胞中获得表达,为进一步研究SCD1基因在鹅肝脏脂肪代谢中的作用奠定基础.

关键词：鹅、SCD1基因、原代肝细胞、真核表达

所属期刊栏目：32

分类号：S858.33(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏省研究生科研创新计划项目CXZZ12_0912;国家自然科学基金项目31072021

在线出版日期：2014-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：5-9