Ⅳ型戊型肝炎病毒ORF3蛋白在人肝细胞中相互作用蛋白的筛选与鉴定

摘要：

戊型肝炎病毒编码3个开放性阅读框:ORF1,ORF2和ORF3,其中ORF3蛋白的功能目前尚不明确.为了进一步了解其功能,研究构建了ORF3哺乳动物表达载体pcDNA3.1Flag-ORF3,利用免疫共沉淀和LC/MS的方法筛选并鉴定肝细胞中可以和ORF3蛋白相互作用的蛋白.结果显示,成功构建了Ⅳ型戊型肝炎ORF3的重组表达载体,并利用免疫印迹检测其可以在哺乳动物细胞中正常表达ORF3蛋白,在肝癌细胞株HepG2中筛选并鉴定到了7个可能和ORF3相互用的蛋白,并推测其中RPS18的可能性较大,进而推测HEV可能通过ORF3与核糖体直接相互作用,从而影响其所感染的细胞中蛋白的正常翻译过程.本研究为进一步认识戊型肝炎病毒ORF3的功能提供了线索,进而有利于揭示戊型肝炎病毒的致病机理.

关键词：戊型肝炎病毒、ORF3、免疫共沉淀、质谱、RPS18

所属期刊栏目：31

分类号：S852.65;R373.21(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金面上项目31070132;农业部公益性行业农业科研专项200903056;2011年度高等学校博士学科点专项科研基金20110073110046

在线出版日期：2013-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：83-87