甜瓜 “Piel de Sapo”TILLING 平台的测序

摘要：

TILLING (Targeting Induced Local Lesions In Genomes)即定向诱导基因组局部突变技术,是一种全新的反向遗传学方法,它借助高通量的检测手段,能够快速有效地从化学诱变剂(EMS)诱变的群体中鉴定出点突变.在TILLING技术中,突变位点的测序检测、EMS诱变群体的构建、目的基因及片段的筛选、碱基错配内切酶的选择都是该技术的核心内容.在甜瓜“Piel de Sapo”TILLING平台的构建中,PCR产物直接测序和克隆测序2种方法用于检测8个突变家系的碱基变化.在直接测序中,4个突变家系的测序结果清晰,能够确认碱基的变化,其他4个家系的结果不清晰,不能确认碱基的改变.在克隆测序中,8个家系的测序结果均清晰,能够直接确定目的基因的点突变.在2种方法的比较中,克隆测序的准确率、效率明显优于直接测序法.

关键词：甜瓜、测序、引物、克隆

所属期刊栏目：30

分类号：S652;Q75(瓜果园艺)

资助基金：National Institute for Agricultural Research;France;Research Centre Juelich-Project Management Juelich FZJ-PTO on behalf of the Federal Ministry of Education and Research;Germany;Ministry for Education and Science;Spain

在线出版日期：2012-12-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：34-39