黄瓜(Cucumis sativus L.)离体再生和转化体系的优化

摘要：

以黄瓜4d苗龄子叶节和农杆菌GV3101为实验材料,对再生体系和转化体系条件进行优化.再生部分,将培养基中的6-BA和ABA设立浓度梯度,并添加适量的AgNO3,进行再生情况对比,得最佳配方MS+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L ABA+2.0 mg/L AgNO3,可直接诱导出芽,最短45 d获得完整植株.转化部分,根据敏感性试验确定选择培养卡那霉素(kan)筛选压,并运用gus瞬时表达法对预培养时间、侵染时间、共培养时间和抗氧化剂的添加等影响转化效率的因素进行优化.结果表明,50 mg/L kan筛选压即可筛选出阳性株；预培养时间1～2 d,侵染时间20～30 min,共培养3d时转化效率较高；抗氧化剂的加入可显著提高转化效率.对该转化体系进行验证,PCR结果初步表明外源基因成功整合入黄瓜基因组中.

关键词：黄瓜、再生、卡那霉素敏感性、抗氧化剂、遗传转化

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分类号：S642.2

资助基金：国家“973”课题2012CB113902;国家自然科学基金31071081;上海市重点学科建设项目B209

在线出版日期：2012-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：41-47