伏马毒素B1单克隆抗体的制备及间接竞争ELISA方法的建立

摘要：

采用戊二醛法将半抗原伏马毒素B1分别与载体蛋白钥孔血蓝蛋白(KLH)和蛋白卵清白蛋白(OVA)偶联成为完全抗原KLH-FB1和OVA-FB1.OVA-FB1作为包被抗原建立ELISA方法;KLH-FB1作为免疫原免疫8周龄Balb/c小鼠,应用杂交瘤细胞融合技术制备单克隆抗体.经三次亚克隆后,筛选出两株(6H3,6H11)能特异、稳定分泌抗FB1单克隆抗体的杂交瘤细胞株.选择其中一株杂交瘤细胞通过体内诱生腹水的方法制备单克隆抗体,经检测表明单克隆抗体的亚型为IgGl,轻链为k型.采用间接ELISA测得腹水纯化后效价达1:16000,抗体对伏马毒素的半数阻断浓度(IC50)为8.26ng/mL,对玉米赤霉烯酮、黄曲霉素B1等结构类似物几乎不存在交叉反应,与其他结构的氯丙嗪、链霉素等无交叉反应.利用获得的抗FB1单克隆抗体,建立了间接竞争ELISA检测方法,检测灵敏度为0.44 ng/mL,检测线性范围为0.93～73.06 ng/mL,加标回收率在线性范围内达到回收率可达78.4%～102%.

关键词：伏马毒素B1、半抗原、单克隆抗体、间接竞争ELISA

所属期刊栏目：29

分类号：R379(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划项目2007AA10Z424

在线出版日期：2011-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：69-74