在毕赤酵母中表达人溶菌酶蛋白的研究

摘要：

将化学合成的人溶茵酶基因舰hLYZ(444 bp)构建到毕赤酵母分泌型表达载体pPICZ上;载体质粒用Sac I线性化后电击法转化毕赤酵母菌株GS115.在舍Zeocin的抗性培养基筛选后PCR鉴定获得了9株重组菌株.重组菌株经甲醇诱导后取表达上清液进行SDS-PAGE电泳和Western blot分析.结果显示,重组hLYZ在毕赤酵母中成功表达,在诱导60 h时表达量最高.用镍亲和层析柱纯化重组hLYZ,用Bradford法测得其含量约为324 mg·L-1.比浊法活性测定结果显示所表达的重组人溶茵酶活性达到4473 U.mL-1.本研究利用毕赤酵母分泌型表达载体成功表达了重组人溶菌酶,并探索了简单有效的纯化和活性测定方法,为利用毕赤酵母系统规模化生产重组人溶菌酶奠定了技术基础.

关键词：人溶菌酶、毕赤酵母、生物活性

所属期刊栏目：26

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家863项目2007AA100503;上海市科委项目055407060

在线出版日期：2008-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：233-236,241