醋酸甲羟孕酮(MPA)人工抗原的合成与单克隆抗体的制备

摘要：

为研制检测醋酸甲羟孕酮(MPA)的免疫学检测技术进行MPA单克隆抗体的制备与鉴定,研究分别采用碳二亚胺法、混合酸酐法将MPA偶联到牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)上制备免疫原(MPA-BSA)与包被原(MPA-OVA),通过BALB/c小鼠免疫、细胞融合、间接ELISA和阻断ELISA筛选、有限稀释法克隆亚克隆获得分泌MPA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并通过ELISA方法对其抗体效价、特异性、敏感性、亚类及稳定性进行鉴定.结果表明:成功合成2种人工抗原,MPA与BSA、 OVA的偶联比分别为8:1、12:1;获得1株稳定分泌MPA单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株2G4H9, McAb腹水的间接ELISA效价为1:8×104, IgG1亚类,K型轻链,腹水抗体IC450>为5.0ng·mL-1,与甲地孕酮、盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和己烯雌酚交叉反应率为12.5%、<0.01%、<0.01%和<0.01%.作者认为:MPA单克隆抗体特异性和敏感性良好,杂交瘤细胞株性能稳定,为进一步研究MPA相关免疫学分析技术奠定了基础.

关键词：醋酸甲羟孕酮、人工抗原、单克隆抗体

所属期刊栏目：26

分类号：S851;Q939.91(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家质量监督检验检疫总局科研项目2006IK017

在线出版日期：2008-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：119-123