中华蜜蜂王浆多肽Apisimin基因转录、克隆与表达研究

摘要：

构建中华蜜蜂(Apis cerana cerana)工蜂头部cDNA文库并进行了测序,从8568个表达序列标签(expression sequence tag,EST)中获得96个Apisimin基因克隆,结果表明Apisimin基因是一个高丰度转录的基因.进一步对克隆分析表明该基因cDNA全长为379 nt,包含一个237nt、可以编码78个氨基酸的ORF.推导的Apisimin蛋白N端含有一个由24个氨基酸残基组成的信号肽,后端为54残基、预计分子量为5.9kDa的成熟肽.该ORF与意大利蜜蜂和印度蜜蜂的Apisimin基因核苷酸同源性分别为100%和95%.将成熟肽编码区进行亚克隆,构建了Apisimin与谷胱甘肽转移酶融合表达的载体pGEX/apisimin,并将重组载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)进行融合表达.SDS-PAGE和薄层扫描表明,表达的融合蛋白分子量为31 kDa,表达量占细菌总蛋白的22.1%,约50%是可溶性的.通过亲和柱进一步纯化了表达的融合蛋白.

关键词：王浆多肽、中华蜜蜂、序列分析、原核表达

所属期刊栏目：24

分类号：S896.3;Q344.13(养蜂、益虫饲养)

资助基金：国家自然科学基金30271008

在线出版日期：2006-11-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：460-464,470