猪圆环病毒2型核衣壳蛋白基因原核表达载体的构建及表达

摘要：

用PK-15细胞增殖PCV-2病毒,提取病毒DNA,用PCR方法扩增核衣壳蛋白(Cap蛋白)全基因,克隆到pET-32a载体中,构建了表达载体pETORF2,转化入大肠杆菌BL21中,用IPTG进行诱导表达,结果显示表达的蛋白大小与设计不符.同样的方法,又构建了表达载体pETRF2,含有Cap蛋白的部分基因,结果显示表达的蛋白大小依然与设计不符.对Cap蛋白编码基因进行改造,在不改变原氨基酸序列的基础上,把其编码密码子全部换成大肠杆菌偏爱密码子,根据此序列,设计了4条长引物,参照SOE的原理,用降落PCR的方法扩增出含Cap蛋白表位基因的片段,并克隆到pET-32a载体中,成功构建了重组表达载体pETP1P4.SDS-PAGE电泳结果表明,表达的蛋白分子量与设计相符.

关键词：猪圆环病毒2型、Cap蛋白、大肠杆菌、表达

所属期刊栏目：23

分类号：S852.651(动物医学（兽医学）)

资助基金：上海市科技兴农科技攻关项目农科攻字2001第3-5

在线出版日期：2006-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：353-359