miR-497-5p在前成骨细胞MC3T3-E1分化和矿化中的作用及机制探讨
目的:研究微小RNA(miR)-497-5p在前成骨细胞MC3T3-E1分化和矿化中的作用,并探讨其相关机制.方法:取第3代MC3T3-E1细胞,分别转染miR-497-5p过表达质粒miR-497-5p mimics、低表达质粒miR-497-5p inhibitor和阴性对照质粒miR-497-5p NC,设为miR-497-5p mimics组、miR-497-5p inhibitor组和miR-497-5p NC组.取不做处理的细胞作为空白组.成骨诱导后14天,检测碱性磷酸酶(ALP)活性;免疫印迹法检测成骨分化相关蛋白骨钙素(OCN)、I型胶原(COL-I)蛋白表达量;茜素红染色法观察矿化情况;免疫印迹法检测Smad泛素化调节因子2(Smurf2)蛋白表达量;双荧光素酶实验验证miR-497-5p与Smurf2的靶向关系.采用SPSS 25.0软件包进行统计学分析.结果:与空白组、miR-497-5p NC组相比,miR-497-5p mimics组ALP活性显著增强,OCN、COL-I蛋白表达量及矿化结节面积构成比显著升高,Smurf2蛋白表达量显著降低(P<0.05);miR-497-5p inhibitor组ALP活性显著减弱,OCN、COL-I蛋白表达量及矿化结节面积构成比显著降低,Smurf2蛋白表达量显著升高(P<0.05);与Smurf23'-UTR-WT+miR-497-5p NC组、Smurf23'-UTR-MT+miR-497-5p mimics组和Smurf23'-UTR-MT+miR-497-5p NC组相比,Smurf23'-UTR-WT+miR-497-5p mimics组双荧光素酶活性值显著降低(P<0.05).结论:过表达miR-497-5p对前成骨细胞MC3T3-E1的分化和矿化具有促进作用,其作用机制可能与负性靶向调控Smurf2蛋白表达有关.
前成骨细胞、微小RNA-497-5p、分化、矿化
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R681(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
江西省卫生健康委科技计划;江西省中医药管理局科技计划
2023-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
17-22
