角质形成细胞低表达Hsp90蛋白与小细胞外囊泡数量的相关性及其临床意义探讨
目的:评价角质形成细胞中热休克蛋白90(heat shock protein 90,Hsp90)表达水平与小细胞外囊泡(small ex-tracellular vesicles,sEVs)数量的 关系.方法:采用人角质形成细胞株(HaCaT),分为野生型组、短发夹RNA干扰组(shRNA组,Hsp90蛋白抑制剂)和格尔德霉素抑制组(17-AAG组,Hsp90低表达),进行体外培养.以超速离心法收集各组培养体系中的sEVs,利用透射电镜观察其形态学特征;蛋白质免疫印迹法鉴定生物学特性;纳米颗粒跟踪分析检测粒子数量.采用GraphPad Prism 8.0软件包中的t检验(非参数Mann-Whitney U检验)统计分析各组之间sEVs的数量差异.结果:超速离心法获得的HaCaT细胞来源的sEVs符合形态学和生物学鉴定标准,sEVs中Hsp90蛋白无明显表达.shRNA干扰角质形成细胞中的Hsp90AA1表达后,其sEVs数量上升.第5天时,shRNA干扰组的sEVs 粒子数为[(177.4±4.18)×108,n=3],与空载质粒组的粒子数[(82.34±4.83)×108,n=3]相比显著升高(P＜0.000 1).17-AAG 抑制 Hsp90蛋白5天后,17-AAG 组的粒子数为[(652.5±26.73)×108,n=3],对照组粒子数为[(262.22±5.44)×108,n=3],差异具有统计学意义(P＜0.000 1).结论:低表达Hsp90蛋白可促进HaCaT细胞分泌sEVs,sEVs可能与炎症状态下上皮细胞和免疫细胞间的物质传递有关.
角质形成细胞、热休克蛋白90、小细胞外囊泡、超速离心
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R781.5(口腔科学)
国家自然科学基金;国家自然科学基金
2022-06-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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