诱导型成骨细胞特异Stat3基因敲除小鼠的构建及验证
目的:运用Cre-Loxp基因敲除系统,构建诱导型条件性Stat3基因敲除小鼠并验证其敲除效率.方法:通过Stat3fl/fl与Col1 creERT2基因型的C57小鼠多代杂交,构建诱导型成骨细胞特异Stat3敲除小鼠Stat3Col1ERT2.取其骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),加入4-羟基他莫西芬(4-OTH)后,采用实时定量PCR技术和免疫印迹技术在mRNA与蛋白水平分别体外验证Stat3敲除效果.于小鼠腹腔注射他莫昔芬,采用免疫荧光染色技术,观察小鼠上颌牙槽骨区域STAT3的表达,以体内验证敲除效果.采用SPSS 24.0软件包对数据进行统计学分析.结果:实时定量PCR和免疫印迹结果显示,Stat3Col1ERT2小鼠BMSCs体外加药诱导敲除后,STAT3的mRNA水平显著下调(P<0.05)、蛋白表达降低(P<0.05).免疫荧光染色结果显示,Stat3Col1ERT2小鼠体内上颌牙槽骨区域成骨细胞的STAT3表达显著降低(P<0.05).结论:本研究成功构建了诱导型成骨细胞特异Stat3基因敲除小鼠,使基因敲除可受观察者时空调控,为今后正畸牙移动、颌骨牵引成骨、颌骨骨折等牙槽骨改建机制的研究提供了新的思路及依据.
STAT3、成骨细胞、诱导型条件性基因敲除小鼠、他莫西芬
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R783.5(口腔科学)
国家自然科学基金;上海交通大学医学院附属第九人民医院“交叉”研究基金-重点项目;上海市“医苑新星”青年医学人才培养资助计划-杰出青年医学人才;上海市教委高水平地方高校协同创新团队;上海交通大学医学院附属第九人民医院临床研究助推计划临+计划;上海交通大学医学院附属上海交通大学医学院附属第九人民医院生物样本库项目;上海市口腔医学研究所院基金“育苗项目”
2020-09-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
337-342