根尖牙乳头干细胞细胞膜片构建及其成骨/成牙本质分化性能研究
目的:构建根尖牙乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAP)细胞膜片,并对其组织学形态和成骨/成牙本质分化性能进行研究,为SCAP细胞膜片应用于年轻恒牙牙髓再生提供实验基础.方法:分离年轻恒牙第三磨牙牙乳头.进行SCAP原代培养.采用流式细胞术检测SCAP表面标志物,茜素红S染色检测其成骨/成牙本质分化.取第3代SCAP,膜片诱导液连续培养14d,形成细胞膜片.对SCAP细胞膜片进行H-E染色,组织学观察;流式细胞术检测SCAP细胞膜片的细胞周期变化;实时定量PCR (qRT-PCR)检测细胞膜片中Runx2、ALP、Col-I基因表达;Western印迹法检测细胞膜片Runx2、ALP蛋白表达水平.采用SPSS17.0软件包对实验结果进行统计学分析,两样本细胞周期检测和qRT-PCR基因检测均数的比较采用t检验.结果:组织学H-E染色显示,SCAP细胞膜片由5~6层细胞组成,细胞量大,细胞之间排列紧密,且富含细胞外基质.SCAP细胞膜片细胞周期G2+S期所占比例较低,而G1期比例较高,提示SCAP细胞膜片增殖性能受到显著抑制(P<0.05).同时,qRT-PCR和Western印迹法结果显示,与SCAP相比,SCAP细胞膜片成骨/成牙本质分化能力显著升高(P<0.05).结论:SCAP细胞膜片富含细胞外基质,且成骨/成牙本质分化能力高于单纯SCAP,SCAP细胞膜片应用于牙髓再生更具有优势.
根尖牙乳头于细胞、细胞膜片、牙髓再生
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R783.1(口腔科学)
国家自然科学基金81771059;沈阳市科学技术计划项目F16-205-1-25
2018-07-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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