siRNA沉默Rsk2基因表达抑制人牙周膜细胞的增殖及成骨分化

摘要：

目的:研究核糖体S6激酶2(ribosomal S6 kinase,Rsk2)基因对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells, hPDLCs)增殖及成骨分化的影响及其作用机制.方法:收集牙科手术拔除的前磨牙,分离其牙周韧带并进行hPDLCs原代培养,取第4～6代细胞用于实验.采用RT-PCR和Western印迹法检测小干扰RNA(siRNA)对hPDLCs内Rsk2的沉默效率,MTT法检测Rsk2 siRNA对细胞增殖的影响,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测ALP活性变化.p38MAPK信号通路抑制剂SB203580处理转染后的hPDLCs,Western印迹法检测Rsk2 siRNA对MAPK信号通路p38蛋白磷酸化的影响.RT-PCR和Western印迹法检测成骨分化标志分子Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor-2,Runx2)、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和成骨蛋白BMP2的表达情况,采用SPSS18.0R软件包对数据进行统计学分析.结果:hPDLCs转染Rsk2 siRNA后,Rsk2表达下调,差异显著(P＜0.05).Rsk2 siRNA显著降低p38蛋白磷酸化(P＜0.05),抑制hPDLCs增殖(P＜0.05),降低ALP活性(P＜0.01),成骨分化标志分子Runx2、OCN和BMP2的表达降低,差异具有显著性.SB203580处理Rsk2 siRNA转染后的hPDLCs发现,细胞增殖、ALP活性、Runx2、OCN和BMP2的表达较Rsk2 siRNA转染组相比,均有显著差异.结论:Rsk2 siRNA通过p38MAPK信号通路抑制hPDLCs增殖和成骨分化.

关键词：Rsk2、人牙周膜细胞、siRNA、增殖、成骨分化

所属期刊栏目：26

分类号：R781.4(口腔科学)

在线出版日期：2018-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：498-503