miR-142-3p通过靶向IRAK1抑制LPS诱导人牙周膜细胞的炎症反应
目的:研究miR-142-3p过表达对脂多糖(LPS)诱导人牙周膜细胞(hPDLCs)分泌炎症因子的影响及其作用机制.方法:组织块法培养原代正常hPDLCs,以不同浓度的LPS处理hPDLCs 6、12、24和48 h;ELISA检测miR-142-3p mimics对2.0 μg/mL LPS诱导的hPDLCs作用24 h后炎症因子(TNF-o、IL-6及IL-1β)的表达情况;双荧光素酶报告基因检测miR-142-3p与白介素1受体相关激酶1(interleukin-1 receptor-associated-1 kinase1,IRAK1)的靶标关系,qRT-PCR检测miR-142-3p和IRAK1 mRNA的表达水平,Western印迹法检测IRAK1、Toll样受体4(toll likereceptor 4,TLR4)及核因子κB (nuclear factor-κB,NF-κB)的蛋白表达水平.采用SPSS 16.0软件包对数据进行统计学分析.结果:2.0 μg/mL LPS作用24 h后,hPDLCs表达miR-142-3p最低,存在显著差异(P＜0.01);加入miR-142-3p mimics后,miR-142-3p表达量显著升高(P＜0.01);miR-142-3p过表达显著降低了炎症因子(TNF-α、IL-6及IL-1β)的表达水平(P＜0.05);双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-142-3p与IRAK1存在直接的靶标关系;miR-142-3p过表达可抑制IRAK1蛋白的表达水平(P＜0.05),但对IRAK1 mRNA表达水平无显著影响(P＞0.05);Western印迹结果显示,miR-142-3p过表达显著下调TLR4蛋白和NF-κB蛋白磷酸化表达水平(P＜0.05).结论:miR-142-3p过表达可减轻LPS诱导的hPDLCs炎症反应,其机制可能通过靶向抑制IRAK1进而抑制TLR4/NF-κB炎症信号通路,从而发挥对牙周组织的保护作用.
miR-142-3p、牙周膜细胞、炎症反应
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R781.4(口腔科学)
2017-03-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
682-687
