变异链球菌LuxS缺陷株甲基循环通路的恢复构建

摘要：

目的:以变异链球菌LuxS缺陷株为模型,构建其密度感应缺陷的甲基循环恢复株.方法:以LuxS为阳性表达对照,通过在变异链球菌LuxS缺陷株中异源表达SahH,实现其代谢通路的恢复构建.通过Western印迹、反转录PCR和信号分子AI-2分泌检测,验证目的蛋白的表达.采用SAS8.0软件包对数据进行统计学分析.结果:Western 印迹检测2种蛋白在大肠杆菌中均得到正确表达,验证了克隆载体的正常表达能力;反转录PCR验证了变异链球菌LuxS缺陷株中luxS及sahH mRNA的存在:发光实验证实LuxS阳性表达对照株AI-2的分泌能力恢复.结论:成功构建变异链球菌LuxS缺陷的代谢恢复株,为探讨LuxS的调控机制提供了分子生物学工具及实验对照.

关键词：变异链球菌、生物膜、密度感应、LuxS、SahH

所属期刊栏目：23

分类号：R780.2(口腔科学)

资助基金：国家自然科学基金81070826,81371143,81300866;上海市启明星计划12QH1401400;Supported by National Natural Science Foundation of China 81070826,81371143,81300866 and partly supported by Shanghai Rising-Star Program 12QH1401400.

在线出版日期：2014-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：385-390