过表达VEGF165和TGFβ1对鼠牙本质样组织再生的影响
目的:探讨重组质粒pcDNA3.1 hisA-VEGF165和pcDNA3.1 hisA-TGFβ1稳定转染仓鼠卵巢细胞(CHO)后持续分泌的血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)和转化生长因子β1(transforming growth factor,TGFβ1)蛋白对大鼠体内牙本质样组织形成的影响.方法:脂质体介导重组质粒pcDNA3.1 hisA-VEGF164和pcDNA3.1 hisA-TGFβ1转染CHO细胞,经G418筛选,建立单克隆细胞株.反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后CHO细胞中VEGF164和TGFβ1mRNA的表达情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测转染后上清中VEGF165和TGFβ1蛋白的表达水平.接种转染后的CHO细胞至胶原膜,选择24只Wistar大鼠双侧上颌第一磨牙为实验牙,将胶原膜置于人工穿髓孔L处,ChemFlex玻璃离子充填窝洞.8周后处死动物取材,制备硬组织切片,甲苯胺蓝染色.采用SPSS17.0软件包对ELISA数据进行统计学分析.结果:RT-PCR和ELISA结果显示,CHO细胞转染后VEGF166和TGFβ1基因和蛋白稳定表达.甲苯胺蓝染色显示,转染pcDNA3.1 hisA-VEGF165的CHO组中穿髓孔下方见毛细血管明显充血及炎症细胞浸润,未见硬组织形成;转染pcDNA3.1 hisA-TGFβ1的CHO组中,穿髓孔下方可见少量深染矿化团块,周围见增生的牙髓成纤维细胞,偶见炎症细胞浸润,未见管状牙本质形成;转染pcDNA3.1 hisA-VEGF165和pcDNA3.1 hisA-TGFβ1的2种CHO组中,穿髓孔下方可见大量深染矿化团块,几乎完全封闭穿髓孔,未见结构规则的牙本质桥形成,团块下端成牙本质细胞呈柱状整齐排列;对照组未见硬组织形成.结论:TGFβ1能促进体内矿化组织形成,VEGF165和TGFβ1共同作用,能更好地促进体内矿化组织形成.
血管内皮细胞生长因子、转化生长因子β1、转染、矿化作用
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R781(口腔科学)
山东省科技发展计划项目2010G0020230;山东省自然科学基金Y2006C47
2014-02-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
649-654
