敲除牙龈卟啉单胞菌菌毛次要组分FimCDE的载体构建

摘要：

目的:构建重组质粒pPHU281-C-Spec-E,用于敲除菌毛蛋白次要组分基因fimCDE.构建fimCDE缺陷的牙龈卟啉单胞菌,为进一步研究FimCDE在感染中的作用奠定基础.方法:厌氧罐培养牙龈卟啉单胞菌菌株ATCC33277,提取基因组DNA后,PCR扩增获得含有人工设计的酶切位点的fimC基因的上游片段及fimE的下游片段,将其克隆到自杀质粒pPHU281内,命名为pPHU281-C-E;再将抗大观霉素的抗性基因插入到C及E片段之间,最终获得重组质粒pPHU281-C-Spec-E.结果:酶切及DNA序列分析验证重组质粒pPHU281-C-Spec-E构建成功.结论:成功构建了含有牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白次要组分基因fimC上游及fimE下游片段的重组质粒pPHU281-C-Spec-E,可用于构建菌毛蛋白次要组分FimCDE缺陷的的突变体.

关键词：牙龈卟啉单胞菌、菌毛蛋白次要组分FimCDE突变体、载体构建

所属期刊栏目：22

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金81070839;江苏省医学领军人才与创新团队项目LJ201110;南京市科技发展计划项目YKK06115;南京市医学科技发展重点项目ZKX1030

在线出版日期：2014-02-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：623-627