重组变形链球菌表面蛋白PAc发酵工艺研究

摘要：

目的:研究表达重组变形链球菌表面蛋白(rPAc)的工程菌pET20b(+)-AP/ BL21(DE3)plysS的发酵条件.方法:通过摇瓶培养,进行发酵条件优化,在5L发酵罐中发酵pET20b(+)-APBL21(DE3)plysS工程菌,并对发酵产物进行SDS-PAGE、Western印迹分析鉴定.结果:确立了pET20b(+)-APBL21(DE3)plysS工程菌的高密度发酵工艺,即LB-2培养基,初始pH值为7.2,溶氧控制为30%以上,补料为10%甘油、5%酵母粉和5%蛋白胨.目的蛋白呈可溶性表达,表达量占菌体总蛋白的45%以上,菌体密度达到44.Western印迹分析显示,rPAc蛋白和抗PAc抗体有良好的结合活性.结论:通过发酵工艺优化,提高了rPAc蛋白的可溶性表达量,为进一步规模化研究和生产奠定了基础.

关键词：发酵、纯化、发酵优化

所属期刊栏目：20

分类号：R781.1(口腔科学)

资助基金：国家自然科学基金30600707

在线出版日期：2012-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：459-463