山羊乳牙牙髓细胞分离培养与矿化诱导的体外研究
目的:分离培养山羊乳牙牙髓细胞,研究其矿化诱导前、后生物学特性的改变.方法:采用改良酶解组织块法培养山羊乳牙牙髓细胞,应用免疫组化方法(SAB法)对第2代细胞进行来源检测,经矿化诱导培养的第4代细胞与常规培养细胞做对照,进行相关生物学特性检测,包括细胞增殖能力、矿化能力、细胞形态改变、蛋白OCN表达、相关成骨基因(ALP、COL-I、OCN、OPN)表达水平.结果:改良酶解组织块法可较快地培养出山羊乳牙牙髓细胞,细胞爬出时间为培养的第3~4天.第2代细胞抗波丝蛋白阳性,抗角蛋白阴性,证明其间充质来源.MTT法测定显示,未诱导细胞的增殖能力明显高于矿化诱导后的细胞.与未诱导细胞相比较,矿化诱导的细胞ALP染色、钙结节茜素红染色均呈强阳性,免疫组化OCN阳性表达.诱导14d后,定时定量PCR检测证实成骨基因OCN、ALP显著上调.结论:本实验采用改良酶解组织块法成功培养出山羊乳牙牙髓细胞;连续矿化诱导培养14d后,山羊乳牙牙髓细胞分泌矿化基质,具有向成骨细胞分化和形成骨组织的潜能.
山羊、乳牙牙髓细胞、矿化诱导、分化
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R780.2(口腔科学)
上海市科学技术委员会资助项目09JC1411700;上海交通大学医学院基金09XJ21030;上海市口腔基础医学开发科研合作项目S30206-KF09
2011-12-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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