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MG-132诱导Tca-8113细胞凋亡的机制探讨

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目的:探讨内质网应激在蛋白酶抑制剂MG-132诱导人舌鳞癌细胞株Tca-8113细胞凋亡中的作用.方法:使用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基常规培养Tca-8113细胞,实验分为5组,3个实验组分别加入MG-132,终浓度为10.0、20.0、30.0μmol/L;阳性对照组加入毒胡萝卜素,终浓度为5.0μmol/L;阴性对照组加入1640培养液.培养24h后,Hoechst 33258 染色法观察凋亡细胞形态学变化:Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,RT-PCR检测GRP78 mRNA,Western 印迹检测caspase-12 蛋白的表达,ELISA 法检测人泛素蛋白连接酶E3浓度.应用SPSS16.0软件包对结果进行统计学分析.结果:MG-132作用Tca-8113细胞24 h后,细胞出现典型的凋亡形态;MG-132实验组细胞凋亡率随MG-132浓度升高而逐渐升高,存在浓度依赖性;MG-132 组 GRP78 的 mRNA 及caspase-12蛋白表达增强;MG-132 组人泛素连接酶E3的浓度分别为28.75±2.28、18.16±0.65、8.85±0.72.结论:MG-132可通过内质网应激途径诱导Tca-8113细胞的凋亡,MG-132可抑制人泛素连接酶E3的表达.

泛素-蛋白酶体抑制剂、MG-132、内质网应激、Tca-8113细胞、凋亡、E3

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R739.8(肿瘤学)

2011-05-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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