含增强型绿色荧光蛋白rhBMP-2基因真核表达载体的构建

摘要：

目的:构建含增强型绿色荧光蛋白的重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)基因真核表达质粒.方法:采用PCR方法扩增rhBMP-2基因,并在两端添加合适的酶切位点;利用定向克隆技术将rhBMP-2基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因分别插入到载体pIRES的上下游多克隆位点中,两者通过IRES连接,以防止融合表达;重组的pIRES-rhBMP2-EGFP在大肠杆菌DH5α内扩增后,通过酶切电泳鉴定和DNA测序证明质粒构建成功.结果:通过对重组质粒pIRES-rhBMP2-EGFP进行酶切鉴定以及DNA序列测定分析,证明真核表达重组质粒pIRES-rhBMP2-EGFP构建成功,开放阅读框架正确.结论:利用PCR、T/A克隆等分子生物学技术,可成功地将编码rhBMP-2的DNA片段和EGFP片段克隆到载体pIRES中,构建出重组子pIRES-rhBMP2-EGFP.

关键词：人骨形成蛋白-2(hBMP-2)、质粒、绿色荧光蛋白

所属期刊栏目：16

分类号：R781(口腔科学)

资助基金：山东省自然科学基金Y2006C125

在线出版日期：2008-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：627-631