骨保护素基因修饰的pSecTag2/B载体的构建

摘要：

目的:克隆骨保护素基因(osteoprotegerin,OPG)的cDNA,构建pSecTag2/B-OPG真核分泌表达穿梭载体,为组织工程和基因工程联合治疗牙周病提供物质基础.方法:提取人胚胎肾293细胞的总RNA,设计和合成特异性引物,进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),扩增出具有抑制破骨细胞功能的OPG基因cDNA,并将其重组到pSecTag2/B载体中,测序鉴定.结果:从293细胞的总RNA中反转录扩增得到编码骨保护素的基因片段,重组到pSecTag2/B载体.经测序证实,此基因与GenBank中[gi:33878056]提供的序列完全一致;重组质粒经PCR、Hind Ⅲ 单酶酶切及EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶酶切,电泳显示均能切下与预期大小相符的片段.结论:本研究成功构建了pSecTag2/B-OPG分泌表达穿梭载体.

关键词：骨保护素、基因、克隆、载体

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分类号：R781.4(口腔科学)

资助基金：安徽省自然科学基金03043304

在线出版日期：2005-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：273-276